《笑林小子之千王大赛》是一部喜剧电影，讲述了阿星（周星驰 饰）利用特异功能在赌王大赛上大放异彩之后，不知所踪；而洪光（秦沛 饰）不甘失败，再度组织“超级赌王大赛”。为了参赛，松爷（刘镇伟 饰）命令三叔（吴孟达 饰）寻找其他具有特异功能的人士。与此同时，大陆方面对阿星在港所做的事情感到不满，并派阿星的姐姐阿梅（梅艳芳 饰）去港捉回阿星。阿梅在三叔家中暂住，并与大陆派遣来的义匪大B（钟镇涛 饰）相识并相爱。最终，阿梅答应传授赌霸特异功能，以帮助她度过困境。赌王大赛如期举行，阿梅却被袭击导致实力丧失，而洪光则找来大陆特异人士为他助阵……